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氫氣知識

氫氣生物學效應的細胞學研究方法

發布時間:2017-09-04 瀏覽次數:次 字號:  【關閉】
經常有一些老師和同學咨詢這個問題,實際上這個具體方法已經在日本07年的文章中有比較詳細的介紹。但有一些細節可能大家一下子無法掌握。我這里把這個內容進行介紹一下,但提醒大家注意,如果將來在寫文章的時候不要忘記在致謝中注明是我告訴你們的具體方法。
  這個方法具體的操作為:
  首先是制備含不同氣體的培養基。二氧化碳、氧氣和氫氣。為什么要制備含不同氣體的培養基?因為這個培養體系需要密閉,為什么需要密閉,主要是避免發生嚴重爆炸的危險。由于氫氣的燃燒能按照體積計算是非常小的,只要把含氫氣的系統體積縮小,就沒有發生破壞性爆炸的危險了。如何制備含不同氣體的培養基,最簡單的方式是把培養基放在一個密閉的軟袋內,只需要充滿2/3的體積,另外1/3用相應的氣體充滿。這個袋子的氣密性一定要足夠好。然后把這個袋子放在加壓艙內加壓到4個壓力4個小時。如果沒有條件,可以把這個袋子的溶液減少到1/2,氣體相應增加。放在4度冰箱內放24小時以上。為了獲得更好的氣體溶液,可以更換幾次氣體。
  其次要制作一個密閉的小培養環境。可以買一個密封盒,大小以放入一個培養扳為標準。下面放一些水和紗布,以保持盒子內的濕度,用三個管子分別連接二氧化碳、氧氣和氫氣,根據需要通入一定體積的氣體。其中二氧化碳的濃度是5%,氧氣與氫氣根據需要調整。至于如何把氣體換到這個盒子內,我建議先用一個氣體混合袋子,內部根據比例把三種氣體混合,然后用這個氣體給密封盒進行換氣。主要的危險就在這個階段,一定要避免發生爆炸。
  能不能直接把含氫氣的培養基根據需要換到細胞內觀察效應。這要根據情況,由于氣體在液體中很容易釋放到空氣中,培養基內的氫氣濃度就隨著時間延長而改變,無法進行比較準確的劑量效應觀察。當然如果效應觀察時間相對比較短,例如6小時以內,這樣做也是可以的。盡管不夠準確,但要知道動物和人體實驗體內的氫氣的濃度也是動態改變的,作用的時間比較短,甚至比培養體系內的變化更快。如果使用這種方法,制備含氫氣的培養基(方法同上)就是唯一要做的準備工作了,目前國內許多實驗室都采用這種方法,如果讓我說是可以的,至少在國際上發表論文是沒有問題的。
  采用開放系統的方法一定要注意培養基深度的影響。由于氣體從液體中總體釋放速度主要決定于體積與釋放面積的比,那么培養基的深度就是一個非常重要的影響因素了。因此一定要保持各組之間的培養基深度盡量要一致。

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